Cromosomopatías en pacientes con cáncer sometidos a radioterapia con cobalto 60

Objetivo: Describir las aberraciones citogenéticas que pueden ser observadas por medio de la técnica Giemsa en fluorescencia y encontradas en pacientes con cáncer antes y después de ser sometidos a tratamiento con radioterapia. Métodos: Se analizó un mínimo de 200 metafases en primera división mitótica antes y después del tratamiento de radioterapia en nueve pacientes que asistieron a la sección de radioterapia del Hospital San Juan de Dios Costa Rica. En cada caso se contabilizó cada tipo de cromosomopatía por medio de la prueba de Giemsa en fluorescencia y utilizando bromodeoxiuridina y naranja de acridina. Resultados: Las cromosomopatías producidas por radioterapia se observaron tanto antes como después del tratamiento sin embargo destacó el incremento en la frecuencia de los cromosomas dicéntricos y anillos céntricos una vez finalizada la terapia. La frecuencia de fracturas cromatídicas de asociaciones satelíticas y de alteraciones morfológicas no se ve afectada por la radioterapia. Uno de los participantes presentó un recuento mitótico bajo. Conclusión: La radioterapia aumenta significativamente la frecuencia de los cromosomas dicéntricos y dicéntricos más anillos en la muestra en estudio. Este trabajo es relevante por ser el primer estudio en Costa Rica en el que se analizan los cromosomas dicéntricos como biomarcadores de exposición a radiaciones ionizantes mediante la prueba de Giemsa en fluorescencia y utilizando bromodeoxiuridina y naranja de acridina.

Aim: The objective of this study was to describe the before and after cytogenetic aberrations found in current patients of radiotherapy. This can be observed through the technique called "Giemsa in fluorescence" Methods: A minimum of 200 metaphases were analyzed in the first mitotic division in 9 patients. The patients where observed before and after radiotherapy treatment at the San Juan de Dios Hospital in Costa Rica. In each case any type of chromosomopathy was counted using the "Giemsa in fluorescence" test as well as Bromodeoxyuridine and acridine orange. Results: The chromosomopathies are observed before and after treatment with radiotherapy. The treatment seems to change the frecuency increasing the dicentric chromosomes and centric rings after the treatment. The frequency of chromatid fractures satellite associations and morphological alterations were not affected by radiotherapy. Conclusion: The chromosomopathies produced by radiotherapy were observed both before and after treatment with variations in their frequency. After radiotherapy dicentric chromosomes and dicentric chromosomes plus rings frequencies increased significantly. A low mitotic count was present this could have been the result of radiation on the bone marrow or by the cell repair and apoptosis system. The standardized " Fluorescence Plus Giemsa" test using Bromodesoxyuridine and acridine orange was used for the fiesta time in Costa Reica. This allowed for the measurement of radiation exposure used in the treatment or detection of diseases and cancer in pacients.

Helicobacter pylori infection and serum pepsinogen concentrations in an elderly population representative of Costa Rica / Infección por helicobacter pylori y concentraciones séricas de pepsinógenos en una población representativa de adultos de Costa Rica

Abstract Introduction: Costa Rica has among the highest mortality rates from gastric cancer in the world, largely due to late detection. It is therefore important that economically and logistically sustainable screening is implemented in order to detect risk of developing cancer. We have previously shown that low pepsinogen (PG) values and infection with Helicobacter pylori-CagA+ are associated with risk of gastric atrophy and cancer in Costa Rican populations. OBJECTIVES: To determine how markers for gastric cancer risk are distributed in an elderly population representative of Costa Rica in order to design a screening strategy. METHODS: The population studied consists of 2,652 participants in a nationally representative survey of ageing. Information concerning epidemiologic, demographic, nutritional and life style factors is available. Serum PG concentrations as well as H. pylori and CagA status were determined by serology. Possible associations were determined by regression analyses. RESULTS: Antibodies to H. pylori were present in 72% of the population and of those, 58% were CagA positive. Infection with H. pylori was associated with higher PGI concentrations (p=0.000) and infection with H. pylori-CagA. with lower PGI concentrations (p=0.025). Both showed association with lower PGI/PGII (p=0.006 and p=0.000). Higher age was associated with lower prevalence of H. pylori infection (OR=0.98; p=0.000) and CagA. (OR=0.98; p=0.000) but not with PG values. Regions with high risk of gastric cancer showed lower PGI (p=0.004) and PGI/PGII values (p=0.021) as well as higher prevalence of H. pylori infection (OR=1.39; p=0.013) but not CagA.. Using cut-off values of PGI<100 µg/L and PGI/PGII<2.0, 2.5 and 3.0, 7-15% of the population would be considered at risk. CONCLUSIONS: H. pylorialone is not a useful marker for risk of gastric cancer. Screening using serum pepsinogen concentrations and infection with H. pylori-CagA. is feasible in the general elderly population of Costa Rica but appropriate cut-off values have to be determined based on more clinical data and follow up capacity.

Resumen Introducción: Costa Rica tiene una de las tasas de mortalidad por cáncer gástrico más altas del mundo, en gran parte debido a la detección tardía. Por lo tanto, es importante que se implemente un tamizaje económico y logísticamente sostenible para detectar el riesgo de desarrollar cáncer. En estudios anteriores demostramos, que valores bajos de pepsinógeno (PG) y la infección por Helicobacter pylori-CagA+ están asociados con el riesgo de atrofia gástrica y cáncer en poblaciones costarricenses. OBJETIVO: Determinar cómo se distribuyen los marcadores de riesgo de cáncer gástrico en una población representativa de adultos de Costa Rica para diseñar una estrategia de tamizaje. MÉTODOS: Se estudió una población representativa a nivel nacional de 2.652 adultos, que formaron parte de un estudio longitudinal sobre envejecimiento. Se dispone de información sobre factores epidemiológicos, demográficos, nutricionales y de estilo de vida. Las concentraciones séricas de PG, así como el estado de H. pylori y CagA se determinaron mediante serología. Las posibles asociaciones se determinaron mediante modelos de regresión (logística y lineal múltiple). RESULTADOS: El 72% de la población presenta anticuerpos contra H. pylori, de ellos, el 58% fueron positivos para CagA. La infección por H. pylori se asoció con altas concentraciones de PGI (p = 0,000) y la infección por H. pylori-CagA+ con bajas concentraciones de PGI (p = 0,025). Ambas pruebas mostraron asociación con una baja razón PGI/PGII (p = 0,006 y p = 0,000). El rango de mayor edad se asoció con una menor prevalencia de la infección por H. pylori (OR = 0,98; p = 0,000) y de CagA+ (OR = 0,98; p = 0,000) pero no se asoció con los valores de PG. Las regiones con alto riesgo de CG mostraron valores bajos de PGI (p = 0,004) y de PGI/PGII (p = 0,021) así como una alta prevalencia de la infección por H. pylori (OR = 1,39; p = 0,013), no así con CagA+. Utilizando valores de corte de PGI<100 µg/L y de PGI/PGII <2,0, 2,5 y 3,0, se consideraría en riesgo de cáncer entre 7-15% de la población. CONCLUSIONES: La infección por H. pylori, por sí sola, no es un marcador de riesgo de CG útil. Es factible realizar el tamizaje de adultos de la población general de Costa Rica, utilizando como marcadores las concentraciones séricas de pepsinógenos y la infección por H. pylori-CagA+, sin embargo, los valores de corte apropiados deben determinarse con base en una mayor cantidad de datos clínicos y la capacidad de seguimiento.

Ensayo de micronúcleos con bloqueo de la citocinesis como biomarcador de daño genético en poblaciones sobreexpuestas a radiaciones ionizantes / Micronucleus assay as biomarker of DNA damage in population exposed to ionizing radiation

Resumen Introducción: las radiaciones ionizantes (RI) son capaces de perjudicar el ADN; para evaluar este fenómeno es posible utilizar la formación de micronúcleos como biomarcador de efecto temprano del daño radioinducido. El ensayo de micronúcleos con bloqueo de la citocinesis (MNBC) es una técnica citogenética que permite demostrar el impacto de agentes genotóxicos. Propósito: en el presente trabajo se describieron mecanismos moleculares involucrados en la radioinducción de micronúcleos, la técnica del MNBC, los criterios de análisis, sus aplicaciones dentro de la investigación biológica y su extensión a la clínica, con énfasis en su empleo como biomarcador del daño genético en grupos sobreexpuestos a RI. Argumentos para la discusión: el MNBC se considera un método confiable, simple y rápido y existe evidencia de su aplicabilidad para el estudio de los efectos biológicos en casos de riesgo ocupacional y en accidentes radiológicos aislados o a gran escala. Conclusiones: el MNBC es una herramienta valiosa que posibilita estimar las consecuencias por dosis bajas de RI en poblaciones involucradas y, a la vez, orientar la toma de decisiones en cuanto a su prevención o atenuación . De igual forma, puede ser utilizado en análisis del campo de la radiobiología, a fin de detallar las incidencias de las radiaciones ionizantes sobre el ADN.

Abstract Introduction. Ionizing radiation (IR) is capable of causing DNA damage. For the evaluation of this phenomenon it is possible to use chromosomal aberrations as biomarkers. The Cytokinesis-Block Micronucleus assay (CBMN) is a cytogenetic technique that allows to demonstrate the effect of genotoxic agents.Proposition:in the present review, we will describe the molecular mechanisms involved in micronucleus radioinduction, the micronucleus technique and criteria for analysis, its applications within biological research and its extension in clinical research, with emphasis on its application as a biomarker of radioinduced genetic damage. Arguments for discussion: the CBMN is considered a reliable, simple and fast technique and there is evidence of its applicability in the evaluation of biological effects in occupationally exposed personnel and in isolated or large-scale radiological accidents. Conclusions: the CBMN a valuable tool in estimating radiological risk in populations exposed to low doses of IR, allowing to guide decision-making regarding prevention or mitigation of exposure to IR in populations involved. Similarly, the cbmn can be used in research in the field of radiobiology, as a means to describe the effects of ionizing radiation on DNA.

Validación de una prueba serológica para detectar la infección por Helicobacter pylori en Costa Rica

Introduction: Helicobacter pylori is a Gram-negative bacterium capable to survive and multiply in the gastric mucosa. It is the most prominent factor in the development of chronic atrophic gastritis, peptic ulcer, adenocarcinoma and MALT lymphoma. It is estimated that half the world population is infected. The economic cost and impact on the quality of life caused by H. pylori are important. There are several methods to detect the bacteria, but some are invasive, expensive, or both. Objective: We compare an inexpensive serological test based on ELISA for the detection of IgG, using the urea breath test (PYtest) as the reference method. Methods: The area under the ROC curve, sensitivity, specificity and predictive values were calculated. A subset of 45 samples was used for validation of the ELISA test, while the assay was evaluated with 185 additional samples. Results: The cut-off point to discriminate between positive and negative infection status by H. pylori was 0.75, using the optical density ratio of each serum and a positive control. With a higher value of the ratio, the probability of being infected increased. Using this criterion, the test showed a sensitivity of 91.4 % and specificity of 93.7 %. All diagnostic values improved when a gray zone was considered. Conclusion: The serological test developed here is equivalent to the urea breath test. However, the serological test is more accessible to the general population because of its lower cost. This serological test could be used in large-scale clinical research.

Introducción: Helicobacter pylori es una bacteria Gram negativa capaz de sobrevivir y multiplicarse en la mucosa gástrica humana. Es el factor más importante en el desarrollo de gastritis atrófica crónica, úlcera péptica, linfoma MALT y adenocarcinoma. Se estima que la mitad de la población mundial está infectada con esta bacteria. La baja en calidad de vida y el costo económico causados por la infección por H. pylori son importantes. Existen varios métodos para su diagnóstico, pero algunos son invasivos, de alto costo o ambos. Objetivo: Comparar una prueba serológica de bajo costo basada en la técnica de ELISA para detección de IgG, usando la prueba de urea en aliento (PYtest) como método de referencia. Métodos: Se calculó el área bajo la curva ROC, sensibilidad, especificidad y valores predictivos. Se utilizaron 45 muestras de suero para validar la prueba de ELISA, mientras que para su evaluación se usaron otras 185 muestras de suero. Resultados: El punto de corte para discriminar entre positivos y negativos para la infección por H. pylori fue de 0.75 en la razón de densidad óptica entre los sueros de las muestras y el control positivo. A mayor valor de la razón, más probabilidad de ser positivo para la infección. Usando este criterio, la prueba tuvo una sensibilidad del 91.4 % y una especificidad del 93.7 %. Todos los valores diagnósticos mejoran al considerar una zona gris. Conclusiones: En la población estudiada, la prueba serológica se comporta de forma equivalente a la prueba de urea en aliento. Tiene la ventaja de que es más asequible a la población general por su bajo costo. La prueba podría ser usada en investigación clínica a gran escala.

Relevance of the plasminogen activation system in the pathogenesis and progression of gastric cancer / La importancia del sistema activador de plasminógeno en la patogénesis y progresión del cáncer gástrico

Abstract Gastric cancer is ranked as the third death-causing cancer and one of the most incident malignancies worldwide. AlthoughHelicobacter pyloriis the most well-established risk factor for the development of this neoplasm, most of the infected individuals do not develop gastric cancer. Two of the main challenges faced by the world's scientific community in the combat against gastric cancer are the unraveling of its pathogenesis and the identification of novel ways to bring down the mortality. Malignant cell invasion of the non-neoplastic adjacent tissue and metastasis are pivotal events during cancer development and progression. Both processes are facilitated by proteases capable of degrading components of the extracellular matrix, some of which have been associated to clinic-pathological aspects of the disease. Recent studies have suggested the possible connection betweenH. pyloriand the expression of some of these proteases in gastric mucosa. This review summarizes the current knowledge about epidemiological, clinical and biological aspects of gastric cancer; it also discusses the main findings about the involvement of the plasminogen activation system in the development and progression of this disease, as well as its potential repercussions in the clinical setting. Rev. Biol. Trop. 66(1): 28-47. Epub 2018 March 01.

Resumen El cáncer gástrico es la tercera causa de muerte por cáncer a nivel mundial y uno de los más incidentes. A pesar de que la infección porHelicobacter pylories el factor de riesgo más reconocido para el desarrollo de esta neoplasia, la mayoría de personas infectadas con la bacteria no desarrolla la enfermedad. Dos de los principales desafíos a los que actualmente se enfrenta la comunidad científica mundial en la lucha contra el cáncer gástrico son el esclarecimiento de la patogénesis y la identificación de nuevos parámetros que contribuyan a disminuir la mortalidad. La invasión de las células malignas al tejido no neoplásico adyacente y la metástasis son eventos claves durante el desarrollo y progresión del cáncer. Lo anterior es facilitado por proteasas capaces de degradar los componentes de la matriz extracelular, algunas de las cuales han sido asociadas con aspectos clínico-patológicos de la enfermedad. Estudios recientes han sugerido la posible relación entre la bacteriaH. pyloriy la inducción en mucosa gástrica de algunas de estas proteasas. Esta revisión resume conocimientos actuales sobre aspectos epidemiológicos, clínicos y biológicos del cáncer gástrico; también discute los principales hallazgos en torno a la participación del sistema activador de plasminógeno en el desarrollo y progresión del mismo, así como sus potenciales repercusiones en la práctica clínica.

Diagnóstico molecular de cromosomopatías fetales en Costa Rica / Molecular diagnosis of fetal chromosomal defects in Costa Rica

En Costa Rica, el diagnóstico de anomalías cromosómicas fetales se realiza solo mediante el análisis citogenético convencional de cromosomas obtenidos de cultivos celulares. Además de que la espera por los resultados puede ser larga, con alguna frecuencia fracasa el cultivo, por contaminación o por mala calidad de la muestra, o las figuras mitóticas no se pueden analizar, por lo que es necesario disponer de una metodología sencilla y barata, para obtener un diagnóstico prenatal rápido y fiable de trisomía 21, 18 ó 13, en embarazos de alto riesgo genético sometidos a amniocentesis o cordocentesis. Métodos: Se diseñaron tres PCRs multiplex para amplificar cuatro distintas repeticiones cortas en tándem, de cada uno de los cromosomas 21, 18 y 13. Se colectaron 93 muestras (88 líquidos amnióticos y 5 sangres fetales), recibidas en el laboratorio entre 2006 y 2008, con solicitud de análisis cromosómico. Los resultados de la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa fluorescente, fueron comparados con el cariotipo obtenido de las mismas muestras para demostrar la fiabilidad del ensayo. Resultados: Para este grupo de datos, la exactitud del ensayo fue del 100 por ciento y se consiguió obtener resultados en 48 horas. Se logró realizar el análisis de repeticiones cortas en tándem en el 77 por ciento de las muestras en las que no se pudo obtener crecimiento celular. Conclusión: La reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa fluorescente demostró ser una metodología sencilla, fiable y rápida, por lo que podría convertirse en una herramienta complementaria del análisis cromosómico convencional. La obtención de resultados rápidos en casos de diagnóstico prenatal podría disminuir el periodo de ansiedad parental por la espera de los resultados, así como permitir un mejor abordaje terapéutico de los fetos afectados.

In Costa Rica, the diagnosis of chromosomal fetal anomalies is realizedonly by conventional cytogenetic analysis of chromosomes obtained from cellular cultures. The waiting for the results can be long. Moreover with some frequency culture fails due tocontamination or bad quality of the sample or they cannot be analyzed. This makes it necessary to have a simple and cheap methodology to obtain an accurate and rapid fetal diagnosis of trisomy 21, 18 or 13, in pregnancies of high genetic risk submitted to amniocentesis or cordocentesis. Materials and methods: Three multiplex PCRs were designed to amplify four different short tandem repeats of each of the chromosomes 21, 18 and 13. There were collected 93 samples (88amniotic fluids and 5 fetal bloods), received in the laboratory between 2006 and 2008 with request ofor chromosomal analysis. The results of the quantitative fluorescent PCR werecompared with the obtained cariotype of the same samples to stablish the accuracy demonstrate the reliability of the assay. Results: Accuracy of the assay was 100% and it was possible to obtain results within 48 hours.STRs analysis could be made in 77% of the samples where the cellular culture could not be done. Conclusion: The quantitative fluorescent PCR demonstrated to be a simple, accurate and rapid methodology, from what it might turn into a complementary tool of the chromosomal conventional analysis. The securing of rapid results in cases of antenatal diagnosis might diminish the period of anxiety parental for the waiting of the results, as well as to allow a better therapeutic management of the affected fetuses.